CP4 EPSPS, ELISA, 96-test

Hạt giống biến đổi gen biểu hiện protein CP4 EPSPS (hay còn gọi là Roundup Ready) có khả năng chịu được thuốc diệt cỏ glyphosate mà nông dân sử dụng để tiêu diệt cỏ dại mà không gây hại cho cây trồng đã được biến đổi gen để kháng thuốc diệt cỏ. CP4 EPSPS ELISA là một thử nghiệm miễn dịch cho việc sàng lọc phát hiện CP4 EPSPS trong hạt ngô, bông và đậu nành, cũng như mẫu lá, nước và đất (xin vui lòng tham khảo chuẩn bị mẫu hoặc chiết xuất phù hợp). Nếu cần thiết, các mẫu dương tính có thể được xác nhận bằng PCR hoặc các phương pháp thông thường khác.

Thử nghiệm là một ELISA “bánh mì kẹp” dựa trên việc nhận diện CP4 EPSPS bởi các kháng thể đặc hiệu. Các chất đối chứng, mẫu đã chuẩn bị, và các chiết xuất được thêm vào các vỉ microtiter đã được phủ kháng thể đa dòng chống CP4 EPSPS. CP4 EPSPS trong các chất đối chứng và mẫu hoặc chiết xuất sẽ liên kết với các vỉ đã được coated kháng thể. Sau 30 phút ủ mẫu và bước rửa, “bánh mì kẹp” hoàn thành bằng cách thêm một kháng thể đơn dòng chống CP4 EPSPS được gắn enzym. Kháng thể liên hợp gắn enzym được rửa khỏi các vỉ sau 30 phút ủ. Sau bước rửa cuối cùng, dung dịch cơ chất được thêm vào để tạo ra tín hiệu màu. Cường độ của màu xanh trực tiếp tỷ lệ thuận với nồng độ CP4 EPSPS có trong mẫu. Phản ứng màu bị dừng lại sau 20 phút và màu sắc được đánh giá bằng máy đọc đĩa ELISA. Mẫu được coi là dương tính khi giá trị hấp thụ cao hơn giá trị hấp thụ của thuốc thử đối chứng âm tính.