| Mã CAT | Sản phẩm | Kích thước | Giá |
|---|---|---|---|
| PB25.85-01 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Lo-ROX | 200 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.85-03 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Lo-ROX | 600 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.85-05 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Lo-ROX | 1000 x 20 μL Reactions (5 x 1 mL) | Contact us |
| PB25.85-50 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Lo-ROX | 10 000 x 20 μL Reactions (1 x 50 mL) | Contact us |
| PB25.86-01 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Hi-ROX | 200 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.86-03 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Hi-ROX | 600 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.86-05 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Hi-ROX | 1000 x 20 μL Reactions (5 x 1 mL) | Contact us |
| PB25.86-50 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Hi-ROX | 10 000 x 20 μL Reactions (1 x 50 mL) | Contact us |
| PB25.87-01 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix No-ROX | 200 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.87-03 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix No-ROX | 600 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.87-05 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix No-ROX | 1000 x 20 μL Reactions (5 x 1 mL) | Contact us |
| PB25.87-50 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix No-ROX | 10 000 x 20 μL Reactions (1 x 50 mL) | Contact us |
| PB25.88-01 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Separate-ROX | 200 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.88-03 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Separate-ROX | 600 x 20 μL Reactions | Contact us |
| PB25.88-05 | Clara® Probe 1-Step Purple Mix Separate-ROX | 1000 x 20 μL Reactions (5 x 1 mL) | Contact us |
Để xem giá của bạn, vui lòng đăng nhập hoặc đăng ký với tham chiếu báo giá của bạn.
Thông số kỹ thuật
Clara® Probe 1-Step Purple Mix Lo-ROX
| Thành phần | 200 phản ứng | 600 phản ứng | 1000 phản ứng | 10 000 phản ứng |
|---|---|---|---|---|
| 4x Clara Probe 1-Step Purple Mix Lo-ROX | 1 x 1 mL | 3 x 1 mL | 5 x 1 mL | 1 x 50 mL |
Clara® Probe 1-Step Purple Mix Hi-ROX
| Thành phần | 200 phản ứng | 600 phản ứng | 1000 phản ứng | 10 000 phản ứng |
|---|---|---|---|---|
| 4x Clara Probe 1-Step Purple Mix Hi-ROX | 1 x 1 mL | 3 x 1 mL | 5 x 1 mL | 1 x 50 mL |
Clara® Probe 1-Step Purple Mix No-ROX
| Thành phần | 200 phản ứng | 600 phản ứng | 1000 phản ứng | 10 000 phản ứng |
|---|---|---|---|---|
| 4x Clara Probe 1-Step Purple Mix No-ROX | 1 x 1 mL | 3 x 1 mL | 5 x 1 mL | 1 x 50 mL |
Clara® Probe 1-Step Purple Mix Separate-ROX
| Thành phần | 200 phản ứng | 600 phản ứng | 1000 phản ứng | |
|---|---|---|---|---|
| 4x Clara Probe 1-Step Purple Mix No-ROX | 1 x 1 mL | 3 x 1 mL | 5 x 1 mL | |
| 50 μΜ ROX Additive | 1 x 200 μL | 1 x 200 μL | 1 x 200 μL |
Clara® Probe 1-Step Mix AquaPlex
| Thành phần | 200 phản ứng | 600 phản ứng | 1000 phản ứng | 10 000 phản ứng |
|---|---|---|---|---|
| 4x Clara Probe 1-Step Mix AquaPlex | 1 x 1 mL | 3 x 1 mL | 5 x 1 mL | 1 x 50 mL |
Thông tin phản ứng
| Thể tích phản ứng | Bảo quản | |||
|---|---|---|---|---|
| 20 μL |
Khi sản phẩm đến nơi, nên bảo quản giữa -30 và -20 °C. Nếu được bảo quản đúng cách, bộ sản phẩm sẽ giữ được hoạt độ cho đến khi hết hạn sử dụng. |
Khả năng tương thích thiết bị
Sản phẩm này tương thích với tất cả các thiết bị qPCR tiêu chuẩn và nhanh. Sử dụng Công cụ lựa chọn qPCR của chúng tôi để tìm hiểu biến thể ROX nào tương thích với thiết bị của bạn.
Câu hỏi thường gặp
Clara® Probe 1-Step Mix và Purple Mix có thể được sử dụng cho cả RT-PCR một bước và hai bước không?
Có. Clara® Probe 1-Step Mix có thể khuếch đại cDNA và RNA mục tiêu một cách hiệu quả như nhau. Tuy nhiên, vì hỗn hợp này chứa RTase, nên nó lý tưởng cho quy trình một bước. Chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng Clara® Probe 1-Step Mix cho quy trình một bước và khi các thí nghiệm yêu cầu phát hiện DNA trong một số mẫu hạn chế, và Clara® Probe Mix cho các giao thức hai bước và phát hiện DNA định kỳ.
Sản phẩm được tạo ra với Clara® và Clara® Purple mixes có thể được phân giải, nhân bản và định danh không?
Có, các sản phẩm PCR được tạo ra từ các hỗn hợp này có các đặc tính giống như các sản phẩm PCR được tạo ra từ Taq polymerase kiểu hoang dã. Chúng có thể được giải mã hoặc phân giải bằng các endonucleases giới hạn theo các giao thức chuẩn. Các sản phẩm có đuôi 3′-d(A) và có thể được sử dụng cho nhân bản TA hoặc có thể được cắt đầu bằng hoặc phân giải bằng các enzyme giới hạn trước khi nhân bản. Để đạt được kết quả tốt nhất, chúng tôi khuyên bạn nên tinh chế các sản phẩm PCR bằng bất kỳ bộ tinh chế PCR tiêu chuẩn nào.
Clara® Probe Mix và Clara® Probe 1-Step Mix có chứa phẩm nhuộm FAM không?
Khi không. Ngoài ROX (nếu có trong bộ), không có phẩm nhuộm nào khác trong các hỗn hợp của chúng tôi. Do đó, bạn có thể sử dụng bất kỳ đầu dò liên kết fluorophore nào cho phản ứng của bạn.
Có bình thường nếu độ huỳnh quang của Clara® Probe Mix và Clara® Probe 1-Step Mix khác với độ huỳnh quang đạt được với các sản phẩm của đối thủ không?
Các sản phẩm khác nhau có thể cho một mức độ huỳnh quang khác nhau. Tuy nhiên, điều này không ảnh hưởng đến độ chính xác của định lượng và giá trị Ct sẽ không khác biệt giữa các sản phẩm.
Việc lưu trữ DNA mẫu trong đệm 1x TE (10 mM Tris-HCl / 1 mM EDTA) có tương thích với qPCR tiếp theo sử dụng Clara® Probe Mix và Clara® Probe 1-Step Mix không?
Có, chất đệm lưu trữ này là tương thích. EDTA sẽ chelate một số magnesi trong hỗn hợp, nhưng không đủ lớn để ảnh hưởng đến phản ứng.
Nồng độ ROX trong Clara® Probe Mix, Clara® Probe 1-Step Mix và các hỗn hợp tím tương ứng là gì?
Các hỗn hợp Clara® Probe Purple và Clara® Probe 1-Step Purple chứa các phẩm nhuộm tham chiếu thụ động ở nhiều công thức khác nhau, mỗi công thức có nồng độ phẩm nhuộm tham chiếu thụ động khác nhau:
Các hỗn hợp Lo-ROX (PB20.65 và PB25.85) chứa 200 nM ROX.
Các hỗn hợp Hi-ROX (PB20.66 và PB25.86) chứa 2 µM ROX.
Các hỗn hợp No-ROX (PB20.67 và PB25.87) không chứa ROX.
Các hỗn hợp Separate-ROX (PB20.68 và PB25.88) bao gồm một ống riêng biệt của 50 µM phụ gia ROX. Điều này cho phép bạn chọn nồng độ ROX mà bạn muốn sử dụng.
Bạn có thể sử dụng Công cụ Lựa chọn qPCR của chúng tôi dưới menu Tài nguyên để xác định hỗn hợp nào của chúng tôi phù hợp nhất với máy qPCR của bạn.
Có khuyến nghị nào về việc khắc phục sự cố nếu có các sản phẩm không đặc hiệu trong qPCR của tôi không?
Có nhiều tùy chọn để xem xét khi tối ưu hóa phản ứng:
- Giảm thời gian khớp cặp/mở rộng xuống còn 5 giây
- Tăng nhiệt độ khớp cặp/mở rộng từ 60 lên 65°C
Pha loãng mẫu DNA bắt đầu với 5ng DNA và sử dụng chuỗi pha loãng mẫu 10x. Ngoài việc chạy những cái này trên gel để xem liệu các sản phẩm không đặc hiệu có tồn tại hay không, hiệu suất của phản ứng có thể được tính toán với phần mềm của thiết bị qPCR sau khi thực hiện pha loãng mẫu. Nếu hiệu suất nằm trong khoảng 90 – 110%, thì amplicon đang được nhân đôi mỗi chu kỳ.
Hỗn hợp này có hiệu quả cho các mẫu micro RNA không?
Có, Clara® Probe 1-Step Mix có thể được sử dụng cho các mẫu micro RNA. Mặc dù chúng tôi không bán các bộ kit dành riêng, tất cả RTase của chúng tôi đều có thể được sử dụng cho việc định lượng và phân tích miRNA.
Chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng một trong hai phương pháp sau:
- Sử dụng các mồi RT tổng quát và thêm các đuôi poly(A) hoặc poly(U) (ví dụ bằng poly(U)-polymerase), sau đó thực hiện tổng hợp cDNA sử dụng các mồi tổng quát1,2.
- Sử dụng các mồi RT cụ thể và bỏ qua bước tạo đuôi1, 3-5.
Nếu bạn không quen thuộc với các chi tiết của những phương pháp đó, xin vui lòng tham khảo danh sách tài liệu dưới đây, phục vụ như một hướng dẫn.
- Dave, V. P. et al. Công nghệ khuếch đại và phát hiện microRNA: cơ hội và thách thức cho chẩn đoán tại chỗ. Lab Invest 99, 452-469, doi:10.1038/s41374-018-0143-3 (2019).
- Mei, Q. et al. Một xét nghiệm dễ dàng và cụ thể để định lượng microRNA bằng một phương pháp RT-qPCR tối ưu. PLoS One 7, e46890, doi:10.1371/journal.pone.0046890 (2012).
- Chen, C. et al. Định lượng thời gian thực microRNAs bằng cách sử dụng RT-PCR hình chóp. Nucleic Acids Res 33, e179, doi:10.1093/nar/gni178 (2005).
- Raymond, C. K., Roberts, B. S., Garrett-Engele, P., Lim, L. P. & Johnson, J. M. Xét nghiệm PCR kéo dài mồi đơn giản, định lượng nhanh để theo dõi trực tiếp microRNAs và RNA can thiệp ngắn. RNA 11, 1737-1744, doi:10.1261/rna.2148705 (2005).
- Androvic, P., Valihrach, L., Elling, J., Sjoback, R. & Kubista, M. RT-qPCR hai đuôi: một phương pháp mới cho việc định lượng miRNA chính xác cao. Nucleic Acids Res 45, e144, doi:10.1093/nar/gkx588 (2017).
Xem thêm