PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes

PCRBIO Ultra Polymerase & Mixes

PCRBIO Ultra Polymerase đã được thiết kế để khuếch đại các mẫu rất khó. Các chỉnh sửa độc quyền làm tăng khả năng tiến trình, kết hợp với hóa chất đệm tiên tiến và công nghệ khởi động nóng, mang lại hiệu suất xuất sắc cho dù mẫu của bạn có chứa nhiều GC hay AT, số lượng thấp hoặc có chứa chất ức chế PCR. Các đặc điểm - Tăng tỷ lệ thành công của PCR với các mẫu khó - Thể hiện khả năng dung nạp cao đối với các chất ức chế PCR - Khuếch đại cụ thể hiệu quả từ các mẫu phức tạp bao gồm các chuỗi giàu GC (lên tới 80%) - Khởi động nóng trung gian antibody cho phép phát hiện không đối thủ đối với các mẫu có số lượng bản sao thấp - Hóa chất đệm tiên tiến bao gồm Mg và dNTPs - Năng suất cao trong điều kiện PCR tiêu chuẩn và nhanh - Độ chính xác cao gấp 3 lần so với Taq - Có sẵn dưới dạng hỗn hợp sẵn 2x tiện lợi với tùy chọn phẩm màu đỏ cho việc nạp gel trực tiếp.
Còn hàng
Liên hệ
Số CATSản phẩmKích thướcGiá
PB10.31-02PCRBIO Ultra Polymerase250 UnitsContact us
PB10.31-10PCRBIO Ultra Polymerase1000 UnitsContact us
PB10.32-01PCRBIO Ultra Mix80 x 50 μL ReactionsContact us
PB10.32-05PCRBIO Ultra Mix400 x 50 μL ReactionsContact us
PB10.33-01PCRBIO Ultra Mix Red80 x 50 μL ReactionsContact us
PB10.33-05PCRBIO Ultra Mix Red400 x 50 μL ReactionsContact us

Để xem giá của bạn, vui lòng đăng nhập hoặc đăng ký với mã báo giá của bạn.

Thông tin thêm

PCRBIO Ultra Polymerase là một enzym cực kỳ mạnh mẽ, được thiết kế để khuếch đại hiệu quả và đáng tin cậy các mục tiêu khó khăn và phức tạp, ngay cả trong các điều kiện khó khăn như sự hiện diện của các chất ức chế. Hệ thống enzym và buffer đã được phát triển để cung cấp hiệu suất PCR vượt trội và tỷ lệ thành công cao trên một loạt các mẫu, bao gồm DNA gen phức tạp và các mục tiêu có hàm lượng GC cao (lên tới 80% GC).

PCRBIO Ultra Polymerase thể hiện khả năng chịu đựng cao với các chất ức chế PCR, khiến nó trở thành sự lựa chọn lý tưởng cho PCR từ mẫu thuộc địa và mẫu thô. Các sản phẩm PCR tạo ra là có đuôi A và có thể được nhân bản vào các vector nhân bản TA. Enzym này đi kèm với một bộ đệm tối ưu chứa dNTPs và MgCl2.

Công thức khởi đầu nóng trung gian miễn dịch kháng thể của chúng tôi ngăn chặn sự hình thành dimers của mồi và sản phẩm không đặc hiệu, cho phép khuếch đại cụ thể và nhạy cảm từ các chuỗi mục tiêu có số bản sao thấp. Để tiện lợi hơn, PCRBIO Ultra Polymerase cũng có sẵn dưới dạng hỗn hợp 2x sẵn có chứa tất cả các thành phần phản ứng ngoại trừ mồi và mẫu. PCRBIO Ultra Mix Red chứa phẩm màu đỏ đã được tải trước thích hợp cho việc nạp trực tiếp và theo dõi trong quá trình điện di gel agarose.

Ứng dụng

  • PCR khó - DNA giàu GC và AT
  • Phát hiện mẫu bản sao thấp
  • PCR từ mẫu thô
  • PCR thuộc địa
  • PCR khoảng cách dài
  • PCR đa dạng
  • Nhân bản TA
  • Giải trình tự thế hệ tiếp theo

Thông số kỹ thuật

PCRBIO Ultra Polymerase

Thành phần 250 Units 1000 Units
PCRBIO Ultra Polymerase (5u/μl) 1 x 50μL 4 x 50μL
5x PCRBIO Ultra Buffer 2 x 1mL 8 x 1mL

PCRBIO Ultra Mix

Thành phần 80 Reactions 400 Reactions
2x PCRBIO Ultra Mix 2 x 1mL 10 x 1mL

PCRBIO Ultra Mix Red

Thành phần 80 Reactions 400 Reactions
2x PCRBIO Ultra Mix Red 2 x 1mL 10 x 1mL

Thông tin phản ứng

Thể tích phản ứng Lưu trữ
50μL Khi nhận hàng, sản phẩm nên được lưu trữ trong khoảng -30 đến -20 °C. Nếu được lưu trữ đúng cách, bộ sản phẩm sẽ giữ được hoạt tính đầy đủ cho đến ngày hết hạn được chỉ định.

Câu hỏi thường gặp

Đệm PCRBIO Ultra 5x được cung cấp cùng với PCRBIO Ultra Polymerase đã được phát triển đặc biệt cho enzyme này và chúng tôi rất khuyến nghị sử dụng chúng cùng nhau. Tuy nhiên, PCRBIO Ultra Polymerase nên tương thích với bất kỳ đệm PCR nào được phát triển để sử dụng với Taq loại hoang dã. Nếu bạn sử dụng một đệm tùy chỉnh với PCRBIO Ultra Polymerase, hãy giữ trong tâm trí rằng các tham số phản ứng như nhiệt độ dẫn đầu và nồng độ enzyme, mẫu, dNTP và MgCl2 có thể cần tối ưu hóa.

Có. Nếu bạn đang làm việc từ các thuộc địa vi khuẩn, hãy sử dụng mũi tiêm vô trùng để lấy một thuộc địa và hòa tan vào phản ứng PCR 50µl. Nếu làm việc từ nuôi cấy lỏng, thêm 5µl của nuôi cấy qua đêm vào hỗn hợp cuối cùng. Theo quy trình chung và tăng thời gian khởi động ban đầu lên 10 phút ở 95°C.

Có. Sử dụng 2 µL mẫu máu cho một phản ứng PCR 50 µL và theo quy trình chung. Xin lưu ý rằng các thành phần trong máu có thể ức chế phản ứng PCR. Thực hiện pha loãng tuần tự mẫu để tìm ra nồng độ mẫu tối ưu cho sự khuếch đại PCR.

Nếu vệt là một vấn đề, tốt nhất là đảm bảo rằng chúng không phải là hình ảnh của việc chạy điện di gel agarose với điều kiện không tối ưu. Các điều kiện không tối ưu bao gồm điện áp cao hoặc không cho đủ thời gian để gel đông lại1.

Bạn cũng có thể cần khắc phục phản ứng PCR và xem xét các gợi ý dưới đây2.

  • Các mồi nên được thiết kế để ngăn chặn các tương tác mồi-mồi và cải thiện độ đặc hiệu.
  • Tăng nhiệt độ bắt cặp hoặc tiến hành PCR với gradient nhiệt độ bắt cặp để xác định nhiệt độ bắt cặp tối ưu.
  • Giảm lượng mẫu trong phản ứng. Đối với DNA chất lượng cao, sử dụng 1–100 ng DNA gen hoặc ≤5 ng DNA plasmid/lambda cho mỗi phản ứng 50 µL.
  • Giảm số lần chu kỳ.
  • Giảm lượng enzyme cho mỗi phản ứng.
  • Giảm nồng độ mồi, nhưng không thấp hơn 100 nM của mỗi mồi.
  • Thêm DMSO vào phản ứng với nồng độ cuối cùng là 5%–10%.

1  Koontz, L. Điện di gel agarose. Phương pháp phòng thí nghiệm trong enzymology: DNA. Phiên bản đầu tiên. edn, Tập 529 35-45 (2013).

2  Lorenz, T. C. Phản ứng chuỗi polymerase: quy trình cơ bản và chiến lược khắc phục và tối ưu hóa. J Vis Exp, e3998, doi:10.3791/3998 (2012).

Bạn có thể muốn xem xét các gợi ý dưới đây và cũng tham khảo tài liệu1.

  • Tối ưu hóa nhiệt độ bắt cặp trong PCR với gradient nhiệt độ bắt cặp.
  • Tăng lượng mẫu trong phản ứng.
  • Tăng số lần chu kỳ.
  • Tăng lượng enzyme cho mỗi phản ứng.
  • Tăng nồng độ mồi, nhưng không vượt quá 1 µM của mỗi mồi.
  • Thử một dung dịch dNTP tươi mới.
  • Tối ưu hóa MgCl2.

1  Lorenz, T. C. Phản ứng chuỗi polymerase: quy trình cơ bản và chiến lược khắc phục và tối ưu hóa. J Vis Exp, e3998, doi:10.3791/3998 (2012).

Thuốc nhuộm không ức chế này, được thêm vào để cho phép tải gel trực tiếp, chạy với tốc độ tương tự như các mảnh DNA 200-300 bp trên gel agarose 1% và ở 50-100 bp trên gel agarose 2%. Bạn có thể nhận thấy một sự chuyển dịch trong trọng lượng phân tử này khi chạy gel với hàm lượng agarose khác nhau.

Enzyme này có tỷ lệ lỗi khoảng 1 lỗi trên 5.0 x 105 nucleotide được thêm vào.

Đối với các sản phẩm khuếch đại dưới 5kb, chúng tôi khuyến nghị 15 giây cho mỗi kb khi khuếch đại từ DNA eukaryotic. Đối với các sản phẩm dài hơn, chúng tôi khuyến nghị thời gian kéo dài từ 40 đến 60 giây cho mỗi kb.
Đã thêm vào giỏ hàng
Xem giỏ hàng và thanh toán