| Số CAT | Sản phẩm | Kích thước | Giá |
|---|---|---|---|
| PB72.10-01 | VeriFi® Library Amplification Mix | 50 x 50 μL Reactions | Liên hệ chúng tôi |
| PB72.10-05 | VeriFi® Library Amplification Mix | 250 x 50 μL Reactions | Liên hệ chúng tôi |
Để xem giá của bạn, vui lòng đăng nhập hoặc đăng ký với mã báo giá của bạn.
Thông số kỹ thuật
VeriFi® Library Amplification Mix
| Thành phần | 50 Phản ứng | 250 Phản ứng |
|---|---|---|
| 2x VeriFi Library Amplification Mix | 1 x 1.25 mL | 5 x 1.25 mL |
VeriFi® Library Amplification Mix
| Thành phần | 50 Phản ứng | 250 Phản ứng |
|---|---|---|
| 2x VeriFi Library Amplification Mix | 1 x 1.25 mL | 5 x 1.25 mL |
Thông tin phản ứng
| Thể tích phản ứng | Lưu trữ | |||
|---|---|---|---|---|
| 50 μL | Khi nhận hàng, sản phẩm nên được lưu trữ ở nhiệt độ từ -30 đến -20 °C. Nếu được lưu trữ đúng cách, bộ kit sẽ duy trì hoạt động đầy đủ cho đến ngày hết hạn được chỉ định. |
Câu hỏi thường gặp (FAQs)
Tôi có thể thực hiện PCR đa mạch với VeriFi® Library Amplification Mix không?
Có. Đối với hầu hết các thí nghiệm đa mạch, chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng VeriFi® Hot Start Polymerase & Mixes (số sản phẩm PB10.45-PB10.47). Tuy nhiên, VeriFi® Library Amplification Mix cũng rất phù hợp cho mục đích này, đặc biệt khi một hoặc nhiều mục tiêu đa mạch chứa vùng giàu GC hoặc có các vùng trình tự khó hoặc lặp lại.
Tôi có thể sử dụng VeriFi® Library Amplification Mix cho các nghiên cứu/khuyếch đại metyl hóa DNA đã xử lý bisulfite không?
Không. Pfu polymerases chỉ có thể khuyếch đại các mục tiêu chứa uracil sau khi đã biến đổi, điều này làm giảm độ chính xác của PCR.
Tôi có thể sử dụng VeriFi® Library Amplification Mix cho PCR chuẩn thay vì khuyếch đại thư viện không?
Có, xin vui lòng làm theo hướng dẫn liên quan trong hướng dẫn sản phẩm. VeriFi® Library Amplification Mix có thể được sử dụng trong các chương trình chu kỳ 3 bước hoặc 2 bước chuẩn và đặc biệt phù hợp để khuyếch đại các mục tiêu có hàm lượng GC rất cao hoặc rất thấp.
VeriFi® Library Amplification Mix có thể được sử dụng trong các thí nghiệm NGS của tế bào đơn không?
VeriFi® Library Amplification Mix có thể được sử dụng để làm giàu dựa trên PCR cho bất kỳ loại thư viện DNA nào.
Tôi có cần bao gồm bước tinh chế giữa ligation adaptor và khuyếch đại thư viện với VeriFi® Library Amplification Mix không?
Chúng tôi khuyên bạn nên bao gồm một bước tinh chế sau khi ligation adaptor và lựa chọn kích thước. Điều này loại bỏ bất kỳ sự không tương thích nào của đệm và đảm bảo rằng các adaptor không được ligation không bị khuyếch đại trong quá trình làm giàu PCR thư viện.
Tôi gặp khó khăn trong việc khuyếch đại một mục tiêu với hàm lượng GC cao, tôi nên làm gì?
Tăng nhiệt độ làm biến tính lên 98-100 °C và tăng thời gian kéo dài.
Thư viện khuyếch đại của tôi có chất lượng kém, tôi có thể cải thiện nó như thế nào?
Tăng nhiệt độ làm biến tính. Tối ưu hóa nhiệt độ khảm và thời gian kéo dài. Tối ưu hóa lượng mồi và mẫu trong phản ứng. Đảm bảo rằng vật liệu bắt đầu có chất lượng cao.
Chiều dài mục tiêu tối đa tôi có thể khuyếch đại với VeriFi® Library Amplification Mix là bao nhiêu?
Chúng tôi đã thành công khuyếch đại được một đoạn 12 kb chứa các vùng giàu GC. Các mục tiêu dài hơn cũng có thể được thử nghiệm thành công.
Lượng mẫu tối thiểu tôi có thể sử dụng cho khuyếch đại thư viện thành công với VeriFi® Library Amplification Mix là bao nhiêu?
Không sử dụng mẫu dưới 10 ng cho khuyếch đại thư viện NGS. Một yếu tố chính trong việc có được thư viện khuyếch đại chất lượng cao là hạn chế số chu kỳ PCR được sử dụng. Sử dụng số chu kỳ cao hơn sẽ dẫn đến nguy cơ cao hơn về lỗi và thiên lệch do PCR gây ra.
Tôi có thể sử dụng VeriFi® Library Amplification Mix cho các nền tảng giải trình tự NGS nào?
VeriFi® Library Amplification Mix đã được kiểm tra và xác thực extensively trên các nền tảng giải trình tự Illumina với các mồi Illumina P5 và P7. Hỗn hợp này nên hoạt động tốt trong việc khuyếch đại các thư viện với các chuỗi adaptor khác nhau, dự kiến sẽ được sử dụng trên các nền tảng giải trình tự khác (ví dụ, Pac Bio và Oxford Nanopore Technologies), nhưng điều này cần được kiểm tra.
Xem thêm