| Số CAT | Sản phẩm | Kích thước | Giá |
|---|---|---|---|
| PB80.21-01 | IsoFast® Bst 1-Step Mix | 100 x 25 μL Phản ứng | Liên hệ với chúng tôi |
| PB80.21-05 | IsoFast® Bst 1-Step Mix | 500 x 25 μL Phản ứng | Liên hệ với chúng tôi |
Để xem giá của bạn, vui lòng đăng nhập hoặc đăng ký với tham chiếu báo giá của bạn.
Thông tin thêm
IsoFast® Bst 1-Step Mix được thiết kế cho phản ứng phiên mã ngược của RNA mục tiêu và khuếch đại isothermal sau đó trong một ống duy nhất.
Hệ thống enzyme kép
Bộ kit sử dụng IsoFast® Bst Polymerase cho hoạt động thay thế strands mạnh mẽ, cho phép tổng hợp DNA ở nhiệt độ ổn định (65˚C) mà không cần chu trình nhiệt. Đại diện cho đoạn lớn của Geobacillus stearothermophilus (trước đây là Bacillus stearothermophilus) DNA Polymerase, phần protein này xúc tác cho quá trình tổng hợp DNA theo hướng 5’-3’ nhưng không chứa miền exonuclease 5’-3’.1 Enzyme được cung cấp dưới dạng hỗn hợp 2x tiện lợi.
Phản ứng phiên mã ngược của RNA mục tiêu được thực hiện bởi RTase Go bền nhiệt và cực kỳ hoạt động, được pha trộn với chất ức chế RNase để ngăn chặn sự phân hủy RNA bởi RNase gây ô nhiễm.
Kết quả nhanh chóng và nhất quán
Được thiết kế cho việc khuếch đại nhanh, IsoFast® Bst 1-Step Mix cung cấp kết quả nhanh chóng và nhất quán trên một loạt các loại mẫu và đã được xác thực cho việc phát hiện định tính axit nucleic SARS-CoV-2 (Hình 1 và 2). Hóa học của đệm đảm bảo năng suất cao và hiệu suất ngay cả trong điều kiện khó khăn, chẳng hạn như khi có chất ức chế.
IsoFast® Bst 1-Step Mix chứa tất cả các thành phần cho việc khuếch đại isothermal RNA mục tiêu nhanh và nhạy, chỉ cần thêm primers, mẫu và nước. Bộ kit được cung cấp với một ống thuốc nhuộm huỳnh quang riêng để cho phép phát hiện thời gian thực với bất kỳ thiết bị qPCR nào.
Sản phẩm này không phù hợp cho PCR.
1 Mead DA, McClary JA, Luckey JA, Kostichka AJ, Witney FR, Smith LM. Bst DNA polymerase cho phép phân tích trình tự nhanh từ lượng mẫu nanogram. Biotechniques. 1991 Jul;11(1):76-8, 80, 82-87.
Ứng dụng
- Khuếch đại thay thế đa dạng
- Khuếch đại isothermal
- Phản ứng phiên mã ngược bằng khuếch đại isothermal (RT-LAMP)
- Chẩn đoán phân tử
- Chẩn đoán thực địa
Thông số kỹ thuật
IsoFast® Bst 1-Step Mix
| Thành phần | 100 phản ứng | 500 phản ứng |
|---|---|---|
| IsoFast Bst Mix | 1 x 1.25mL | 4 x 1.6mL |
| RTase Go | 1 x 200µL | 1 x 1mL |
| 20x Fluorescent Dye | 1 x 125µL | 1 x 625µL |
Thông tin phản ứng
| Thể tích phản ứng | Lưu trữ | |||
|---|---|---|---|---|
| 25μL |
Khi nhận hàng, sản phẩm nên được lưu trữ ở nhiệt độ giữa -30 và -20 °C. Nếu lưu trữ đúng cách, bộ kit sẽ giữ lại hoạt tính đầy đủ cho đến ngày hết hạn được chỉ định. |
Tài liệu
Tờ rơi sản phẩm
Hướng dẫn sử dụng
Bảng dữ liệu an toàn
Câu hỏi thường gặp (FAQs)
IsoFast® Bst 1-Step Mix có thể bị vô hoạt do nhiệt không?
Có, cả IsoFast® Bst Polymerase và RTase Go đều có thể bị vô hoạt bằng cách đun ống ở nhiệt độ >80°C trong 10 phút.
IsoFast® Bst 1-Step Mix có thể được sử dụng ở nhiệt độ khác ngoài 65°C không?
Có, enzyme hoạt động trong khoảng từ 57°C đến 65°C. Chúng tôi không khuyến nghị sử dụng nó ở các nhiệt độ ngoài khoảng này vì hoạt động sẽ giảm.
IsoFast® Bst 1-Step Mix có thể được sử dụng cho giải trình tự chu trình nhiệt không?
Rất tiếc, không thể, vì nhiệt độ phản ứng quá cao cho sự ổn định của enzyme.
IsoFast® Bst Polymerase trong IsoFast® 1-Step Mix có hoạt tính reverse transcriptase không?
Có, nhưng nó quá thấp để sử dụng trong các ứng dụng phiên mã ngược. Đối với một số bộ mồi và mục tiêu, IsoFast® Bst Polymerase có thể được sử dụng như một enzyme đơn (RT/DNA polymerase), nhưng chúng tôi khuyến nghị sử dụng enzyme phiên mã ngược RTase Go như đã chỉ định.
Tôi nên sử dụng thuốc nhuộm huỳnh quang như thế nào?
Thuốc nhuộm huỳnh quang intercalating được cung cấp ở nồng độ 20x. Khuyến nghị sử dụng 1.25μL cho mỗi 25μL phản ứng khi theo dõi các phản ứng trên hầu hết các thiết bị qPCR thời gian thực. Kênh FAM của các máy đo huỳnh quang thời gian thực thông thường có thể được sử dụng để đọc thuốc nhuộm.
Tôi nên kỳ vọng kết quả trong bao lâu?
Sự khuếch đại của bất kỳ mục tiêu nào thay đổi tùy thuộc vào nhiều yếu tố bao gồm thiết kế mồi, chất lượng và số lượng mẫu. Thông thường, các bộ kit trong dòng IsoFast™ Bst sẽ đạt được kết quả dương tính trong khoảng từ 5 đến 30 phút.
IsoFast® Bst 1-Step Mix có được cung cấp kèm với dNTPs không?
Có. Cả dung buffer và hỗn hợp đã chứa dNTPs, vì vậy không cần phải đặt hàng dNTPs riêng.
Các thành phần nào được bao gồm trong bộ IsoFast® Bst 1-Step Mix?
Bộ kit gồm có 2x IsoFast® Bst Mix (bao gồm dung buffer khuếch đại, dNTPs, MgSO4, IsoFast® Bst polymerase) và RTase Go với nồng độ tối ưu cho khuếch đại isothermal phiên mã ngược. Bộ kit cũng chứa một ống thuốc nhuộm huỳnh quang 20x có thể liên kết với dsDNA để phát hiện sản phẩm thời gian thực. Người dùng chỉ cần thêm mồi và RNA mục tiêu.
Khi nào nên chọn IsoFast® Bst Polymerase làm enzyme?
IsoFast® Bst Polymerase là một DNA polymerase với hoạt tính tách chuỗi rất tốt. Do nó được tách ra từ vi khuẩn ưa nhiệt vừa phải Bacillus stearothermophilus (gần đây được đổi tên thành Geobacillus stearothermophilus), nhiệt độ tối ưu là 60-65°C cao hơn so với DNA Polymerase I, Mảnh Klenow hoặc phi29 polymerases (37°C), các polymerase tách chuỗi thường được sử dụng khác.
Điều này hữu ích trong việc thiết kế các chiến lược giải trình tự cũng như công nghệ khuếch đại isothermal. Ví dụ, nhiệt độ phản ứng cao hơn giúp dễ dàng giải trình tự qua các vùng giàu GC.
Xem thêm