RiboShield® RNase Inhibitor

Để lưu trữ mẫu, chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng chất ức chế RNase RiboShield® dưới dạng dung dịch 100x (tức là, nồng độ của chất ức chế RNase trong dung dịch lưu trữ nên là 0.4 U/μL). Nồng độ cuối cùng này có thể vượt quá mà không ảnh hưởng tiêu cực đến các phản ứng enzym downstream, nhưng thường là không cần thiết trừ khi bạn nghi ngờ bị ô nhiễm RNase.

Tất cả các sản phẩm PCRBIO cho RT-PCR 1 bước và 2 bước cũng như cho tổng hợp cDNA đã chứa chất ức chế RNase, vì vậy không cần thêm chất ức chế RNase RiboShield® khi sử dụng những sản phẩm này.

Nếu sử dụng với các bộ kit khác, chúng tôi khuyên bạn nên thêm 1µL (40U) chất ức chế RNase RiboShield® vào một hỗn hợp phản ứng 20µL. Trong trường hợp nguồn RNA được biết là chứa nhiều RNase, có thể cần thực hiện một cuộc titrasi để xác minh sự bảo vệ hoàn toàn của axit ribonucleic.

Chất ức chế RNase RiboShield® được thiết kế để sử dụng trong các ứng dụng nhạy cảm với RNA như RT-qPCR, tổng hợp cDNA và RNA-seq, nơi sự hiện diện của thậm chí một lượng nhỏ RNase cũng có thể gây hại cho chất lượng RNA và kết quả thí nghiệm. Ngoài ra, nó cũng có thể được thêm vào RNA đã chiết xuất để bảo tồn chất lượng RNA trong các khu vực có nguy cơ ô nhiễm RNase cao hoặc vào các dung dịch chiết xuất RNA như những gì được sử dụng trong nghiên cứu của Pereira et al., 2010, để cải thiện sự bảo tồn tính toàn vẹn của RNA khi bạn tiến hành quy trình làm việc của mình.

(Pereira MJB, Behera V, Walter NG (2010) Purification Không làm biến tính của RNA được gập lại đồng thời tránh sự không đồng nhất gập phổ biến. PLOS ONE 5(9): e12953. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0012953)

Chất ức chế RNase RiboShield® hoạt động như một lá chắn chống lại sự phân hủy của RNA mục tiêu có thể xảy ra do sự ô nhiễm ribonuclease trong quá trình chuẩn bị RNA.

Chất ức chế RNase RiboShield® là một chất ức chế dựa trên protein không liên kết một cách cố định và chặn hoạt động của các RNase phổ biến và gây rắc rối nhất, bao gồm các RNase loại trung tính của eukaryote (ví dụ: RNase A, B và C). Nó không ức chế RNase T1, T2, U1, U2, CL3, RNase I và H.