| Số CAT | Sản phẩm | Kích thước | Giá |
|---|---|---|---|
| PB15.11-08 | PCRBIO Rapid Extract Lysis Kit | 80 x 100 μL Extractions | Liên hệ với chúng tôi |
| PB15.11-24 | PCRBIO Rapid Extract Lysis Kit | 240 x 100 μL Extractions | Liên hệ với chúng tôi |
Để xem giá của bạn, vui lòng đăng nhập hoặc đăng ký với tham chiếu báo giá của bạn.
Thông Tin Thêm
Kit Chiết Xuất Nhanh PCRBIO cung cấp phương pháp chiết xuất DNA nhanh trong định dạng tiện lợi, dễ sử dụng. Bộ kit chứa một hệ thống đệm phân giải và protease cho phép tạo ra DNA sẵn sàng cho PCR để sử dụng trong các phản ứng PCR hoặc qPCR tiếp theo.
Loại bỏ nhu cầu sử dụng các phương pháp chiết xuất DNA tốn công sức và thời gian với bộ kit nhanh chóng và đơn giản này, đã được tối ưu hóa cho nhiều loại mẫu khác nhau. Bộ kit đặc biệt phù hợp với mô rắn như đuôi chuột hoặc tai chuột, và cũng có thể được sử dụng với mô mềm, nang lông, mẫu tăm miệng, máu động vật có vú và mô FFPE.
Ứng Dụng
- Điểm gen
- Xác định gen chuyển giao
- Phân tích knockout
Thông số kỹ thuật
PCRBIO Rapid Extract Lysis Kit
| Thành phần | 80 Chiết xuất | 240 Chiết xuất | ||
|---|---|---|---|---|
| 5x PCRBIO Rapid Extract Buffer A | 1 x 1.6 mL | 3 x 1.6 mL | ||
| 10x PCRBIO Rapid Extract Buffer B | 1 x 800 μL | 3 x 800 μL |
PCRBIO Rapid Extract Lysis Kit
| Thành phần | 80 Chiết xuất | 240 Chiết xuất | ||
|---|---|---|---|---|
| 5x PCRBIO Rapid Extract Buffer A | 1 x 1.6 mL | 3 x 1.6 mL | ||
| 10x PCRBIO Rapid Extract Buffer B | 1 x 800 μL | 3 x 800 μL |
Thông tin phản ứng
| Thể tích phản ứng | Lưu trữ | |||
|---|---|---|---|---|
| 100 μL | Khi nhận hàng, các sản phẩm nên được lưu trữ ở nhiệt độ giữa -30 và -20 °C. Nếu được bảo quản đúng cách, bộ sản phẩm sẽ giữ được hoạt tính đầy đủ cho đến ngày hết hạn được chỉ định. Bộ sản phẩm cũng có thể được lưu trữ ở 4 °C trong tối đa 1 tháng. |
Tài liệu
Tờ rơi sản phẩm
Hướng dẫn sử dụng
Bảng dữ liệu an toàn
Câu hỏi thường gặp (FAQs)
Tôi có thể sử dụng bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO để chiết xuất và khuếch đại DNA từ vài chục tế bào trên giấy lọc không?
Các hỗn hợp PCR của chúng tôi hoạt động đáng tin cậy với 10 hoặc nhiều bản sao mẫu cho mỗi phản ứng nhưng không thấp hơn mức đó. Giữ DNA đã chiết xuất ở thể tích thấp nhất có thể và không pha loãng thêm sau khi vô hiệu hóa protease. Chúng tôi khuyên bạn nên thiết lập xét nghiệm với nhiều tế bào hơn và khi các điều kiện đã được thiết lập, có thể điều chỉnh xuống từ đó.
Bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO có thể được sử dụng để chiết xuất và khuếch đại DNA từ một koloni hoặc từ lysate tế bào vi khuẩn không?
Có, nó có thể được sử dụng để khuếch đại DNA từ các koloni vi khuẩn hoặc lysate tế bào vi khuẩn, tuy nhiên, không cần thiết phải sử dụng bộ kit chiết tách nhanh này để thực hiện PCR koloni thường quy. Nếu bạn đang làm từ các koloni vi khuẩn, hãy sử dụng một đầu pipet vô trùng để nhặt một koloni và hòa tan vào 50µl phản ứng PCR. Nếu làm từ nuôi cấy lỏng, hãy thêm 5µl của nuôi cấy qua đêm vào hỗn hợp cuối cùng. Thực hiện theo giao thức chung và tăng thời gian biến tính ban đầu lên 10 phút ở 95°C.
Đối với qPCR, có thể quan trọng để chiết xuất DNA với bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO nhằm giảm thiểu tiếng ồn nền và kiểm soát lượng DNA được thêm vào phản ứng.
DNA đã chiết xuất có thể được lưu trữ lâu dài ở -20 độ C không?
Chúng tôi khuyên bạn nên lưu trữ DNA đã chiết xuất ở -20°C trong thời gian ngắn, nhưng để lưu trữ lâu dài, chúng tôi khuyên bạn nên tinh chế DNA và hòa tan lại trong một đệm tiêu chuẩn.
DNA đã chiết xuất có thể được sử dụng cho qPCR không?
Có, bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO có thể được sử dụng để tạo ra mẫu cho qPCR. Sử dụng bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO để chuẩn bị mẫu, sau đó sử dụng mẫu đó trong phản ứng qPCR theo hướng dẫn của bộ kit qPCR.
DNA đã chiết xuất có thể được khuếch đại bởi các polymerase không phải từ PCRBIO không?
DNA đã chiết xuất nên phù hợp để sử dụng với bộ kit PCR của nhà sản xuất khác.
Có quan trọng không khi vô hiệu hóa protease ở nhiệt độ 95 độ C?
Protease là một enzym rất hoạt động, và nếu nó không được vô hiệu hóa đúng cách qua bước biến tính bằng nhiệt, nó có thể nhanh chóng phá hủy polymerase trong bước PCR.
Các điều kiện cần thiết để phân hủy lông vũ trước khi sử dụng bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO là gì?
200 mM DTT nên được thêm vào lông vũ và để ủ qua đêm nhằm phân hủy keratin.
Bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO bao gồm những gì?
5x PCRBIO Rapid Extract Buffer A (đệm phá vỡ) và 10x PCRBIO Rapid Extract Buffer B (đệm protease).
Sự khác biệt giữa bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO và bộ kit PCR nhanh PCRBIO là gì?
Bộ kit PCR nhanh PCRBIO có cùng thành phần với bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO cộng thêm PCRBIO HS Taq Mix Red cho việc khuếch đại PCR tiếp theo.
Kích thước của mẫu FFPE mà bạn khuyến nghị là gì?
Đối với mẫu mô được cố định bằng formalin và nhúng paraffin (FFPE), chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng 1 – 2 mm2 của một lớp cắt 10 µm. Nếu bạn sử dụng ít hơn mức đó, bạn có thể không thu được đủ DNA cho PCR.
Mẫu nào có thể sử dụng với bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO?
Bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO đã được thử nghiệm với danh sách các loại mô sau:
- Nuôi cấy tế bào động vật có vú
- Mô động vật từ nhiều loài khác nhau (Cá, tôm hùm, đuôi/mí tai chuột, cá zebra, giun tròn, thận, nang lông)
- Côn trùng như Drosophila, muỗi, bọ (chân, cánh)
- Mẫu niêm mạc miệng
- Vi khuẩn Gram dương
- Mọc nấm
- Mẫu phân
- FFPE
- Máu1
- Mảnh vảy cá
Các loại mô sau có thể cần một bước rửa trước khi bắt đầu giao thức chiết tách nhanh PCRBIO2
- Men2,3 (rửa trước hoặc tiêu hóa bằng zymolase để có được spheroblasts)
- Lông vũ4 (cần điều chỉnh giao thức xem bên dưới)
- Mẫu phân5 (cần một loạt pha loãng để loại bỏ các chất ức chế)
Nếu bạn có một lượng vật liệu khởi đầu nhỏ, chúng tôi khuyên bạn nên giữ DNA đã chiết xuất ở thể tích thấp nhất có thể và tránh bất kỳ pha loãng nào sau khi vô hiệu hóa protease.
1 Batubara, A. và cộng sự. 2016. Nghiên cứu về đa hình gene BMP15 ở dê Boer, Kacang và Boerka. Jurnal Ilmu Ternak Dan Veteriner 21(4): 224-230. DOI: http://dx.doi.org/10.14334/jitv.v21i4.1636 (2016).
2 Inglis, P.W. và cộng sự. 2018. Các giao thức nhanh và không tốn kém cho việc chiết xuất DNA và RNA chất lượng cao nhất quán từ các mẫu thực vật và nấm khó khăn cho việc định gen SNP cao thông lượng và ứng dụng phân tích chuỗi. PLOS ONE | https://doi.org/10.1371/journal.pone.0206085 Ngày 18 tháng 10.
3 Suzuki, T. & Iwahashi, Y. 2013. Chuẩn bị RNA của Saccharomyces cerevisiae bằng phương pháp tiêu hóa có thể dẫn đến kết quả sai lệch. Appl Biochem Biotechnol 169:1620–1632
DOI 10.1007/s12010-012-0051-8
4 Bello, N. và cộng sự. 2001. Tách chiết DNA gen từ lông vũ. J Vet Diagn Invest 13:162–164
5 Nantavisai, K. et al. 2007. Đánh giá cảm giác của các phương pháp chiết xuất DNA và PCR trong việc phát hiện Giardia duodenalisin trong mẫu phân. J. Clinical Microbiology. 45: 581–583 doi:10.1128/JCM.01823-06
Tại sao màu sắc của dịch siêunat chuyển đổi?
Thay đổi màu sắc của dịch siêunat có thể do các sắc tố được giải phóng từ mô vào dịch siêunat hoặc thay đổi pH. Những thay đổi trong màu sắc của dịch siêunat không nhất thiết ảnh hưởng đến phản ứng PCR.
Các phản ứng PCR phía dưới có hoạt động nếu mẫu của tôi có mức độ cao của các chất ức chế (như trong mẫu máu và phân) không?
Bộ kit chiết tách nhanh PCRBIO có thể được sử dụng với máu người, tuy nhiên, các thành phần trong máu có thể ức chế phản ứng PCR. Do đó, có thể là một ý tưởng tốt để thực hiện một loạt pha loãng của DNA đã chiết xuất để tìm ra nồng độ mẫu tối ưu cho sự khuếch đại PCR.
Nếu sự khuếch đại không đạt được độ tối ưu, chúng tôi khuyên bạn nên thực hiện một bước kết tủa DNA bằng isopropanol/acetate trước khi phản ứng PCR.
Xem thêm